化妆品原料细菌含量的检验方法
信息类型:硅油知识  信息来源:http://www.xingye201.com  添加时间:2012-12-11 23:03:21  关注次数:2

 1化妆品各种原料染菌的检验方法同化妆品产品的微生物检验方法
  2 生产化妆品用水的染菌检验
  2.1 细菌总数
  细菌总数是指1ml水样在营养琼脂培养基(1)中,于37℃经24小时培养所生长的细菌菌落的总数。
  以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1ml充分混匀的水样,注入灭菌平皿中,倾注约15ml已融化并冷却到46℃左右的营养琼脂培养基(1),并立即旋摇平皿,使水样与培养基充分混匀。每次检验时应平行接种二个平皿,同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。待冷却凝固后,翻转平皿,使底面在上,置于37℃恒温箱内培养24小时,进行菌落计数,即为1ml水中的细菌总数。
  2.2 粪大肠菌群
  2.2.1 发酵法
  以无菌操作吸取水样10ml,加到装有10ml双倍浓度乳糖胆盐培养基试管中(内装小倒管),共接种5管,以下操作步骤同化妆品粪大肠菌群检验方法。
  结果判定:根据试验证实为粪大肠菌群阳性或阴性的管数,查粪大肠菌群最可能数(MPN)检索表,报告每100ml水中的粪大肠菌群最可能数。
  表3-3-1 大肠菌群最可能数(MPN)检索表
 
 
  
  2.2.2 滤膜法
  滤膜是一种微孔薄膜,孔径为0.45μm,能滤过大量水样,将水中含有的细菌截留在滤膜上经培养可计数。
  使用前应先将滤膜灭菌,灭菌方法可用水浴煮沸,连续灭菌3次,每次15min,每次煮沸灭菌后需更换水并洗涤2~3次,以除去残留溶剂。高压灭菌也是一种可以使用的方式。所用滤器可用高压或火焰灭菌。
  用无菌镊子加住滤膜边缘,将粗面向上,贴放在已灭菌的滤床上,固定好滤器,将100ml水样注入滤器中,进行抽滤,滤完后,再抽气约5秒钟,取下滤器,用无菌镊子夹住滤膜边缘,移放到MFC培养基(2)上使滤膜截留细菌面向上,并紧贴培养基,两者间不得留有气泡,盖好皿盖,翻转平皿,将平皿放到44.5℃隔水式培养箱中,或放到防水塑料袋中,封好,将塑料袋浸到44.5℃水浴中,培养24小时。粪大肠菌群的菌落是蓝色,而非粪大肠菌群的菌落为灰色至奶油色,记录典型的菌落数。如有介于两者之间的典型菌落,可经涂片染色镜检和复发酵试验以证实之。
  2.3 其他菌(绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌)的检验
  这二种菌在水中的污染量不多,故应先将水样浓缩集菌,可用滤膜过滤方法,将细菌阻留在滤膜上,将滤膜放到相应的分离培养基上培养,如检验绿脓杆菌就放到十六烷三甲基溴化铵平板上,或乙酰胺琼脂平板上;检验金黄葡萄球菌的时候,将滤膜放到血琼脂的平板上,或B.P琼脂平板上,以下检验步骤同化妆品检验。
  注解:
  (1)营养琼脂培养基的成分和制法同普通营养琼脂斜面。
  (2)MFC培养基
  成分:胰胨            5g
     酵母浸膏          3g
     氯化钠           5g
     乳糖            12.5g
     胆盐3号(bile salt No.3) 1.5g
     或混合胆盐
     琼脂15g
     苯胺蓝(aniline blue)   0.2g
     蒸馏水           1000ml
  制法:在1000ml蒸馏水中先加入含1%玫红酸的0.2N的氢氧化钠溶液10ml,混匀后,取500ml加入琼脂煮沸溶解,于另外500ml蒸馏水中,加入除苯胺兰以外的其他试剂。加热溶解后,倒入已溶解的琼脂。混匀,调pH为7.4,加入苯胺兰煮沸迅速移开热源,待冷至60℃左右,制成平板,不可高压灭菌。
  制好的培养基应存放在2~10℃,不应超过96小时。 
 

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